在診斷重症肌無力時，根據典型的病史，重症肌無力受累骨骼肌極易出現疲勞及相應的體徵，並有朝輕暮重的規律，經休息或用抗膽鹼酯酶藥物治療後症狀有改善等，一般即可以診斷。
重症肌無力診斷標準爲：
1、眼肌、延髓支配肌肉、呼吸肌、全身肌肉極易疲勞，朝輕夕重。
2、可疑的骨骼肌疲勞試驗陽性。
3、藥物試驗陽性：新斯的明0.5～1.0毫克肌肉注射，30～60分鐘內受累肌肉明顯好轉；騰喜龍試驗，靜注2mg觀察20秒，如無出汗、唾液增多、心率加快等副作用，再給8mg，1分鐘內症狀明顯好轉。
4、重複電刺激受累肌肉的運動神經，低頻刺激或高頻刺激，肌肉動作電位幅度很快遞減10%以上爲陽性。
5、血清乙酰膽鹼受體抗體陽性。
6、單纖維肌電圖：可見興奮傳導延長或阻滯，相鄰電位時間差值重點延長。
對只有臨牀症狀，缺乏客觀體徵，或體徵不典型者，應進一步做診斷性試驗、實驗室檢查及特殊檢查以明確診斷。
