一、結核菌檢測
是確診肺結核最特異性的方法，在痰中找到結核菌是確診肺結核的主要依據。塗層抗酸染色鏡檢查迅速簡單，我國非典型分枝桿菌還很少見，抗酸桿菌陽性，肺結核診斷基本成立。直接厚塗的陽性率優於薄塗，目前普遍採用。熒光顯微鏡檢查適合於大量標本快速檢查。沒有痰和孩子不咳嗽，可以用早上的胃洗液找結核菌，大人也可以用纖維支鏡檢查，也可以用涮液找結核菌。痰菌陽性表明其病竈開放，具有傳染性。除菌量多(每毫升10萬個以上)時，直接塗層容易呈陽性，是社會感染源。痰菌量少（每毫升不超過1萬個），可採用集菌法。
培養法更準確，不僅可以知道結核菌的生長繁殖能力，還可以進行藥物敏感試驗和菌型鑑定。結核菌生長緩慢，使用改良羅氏培養基，通常需要4~8周。培養雖然費力，但準確可靠，特異性高，塗片陰性或診斷存在疑問時，培養尤爲重要，培養菌株可進一步測定藥物敏感性，爲治療尤其復治時提供參考。
將標本在體外用聚合酶鏈反應(PCR)法，使所含微量結核菌DNA得到擴增，用電泳法檢出。1個結核菌約含1fgDNA，40個結核菌即可有陽性結果。該法不必體外預培養，特異性強，2天即可出報告，快速、簡便，並可鑑定菌型，不足之處是可能出現假陽性或假陰性。
血清學檢查近年來開展酶聯免疫吸附試驗(ELISA)法檢查結核抗體，用PCR法檢查分枝桿菌。
二、影像學檢查
胸部X線檢查可以發現肺內病變的部位、範圍、有無空洞或空洞大小、洞壁厚薄等。x線對各種結核病變的透過度不同，通過x線檢查大致可以估算結核病變的病理性質，早期發現肺結核，判斷病情的發展和治療效果，有助於決定治療方案。必須指出，由於不同原因引起的肺病變可能呈現相似的x光圖像，因此不能僅僅通過x光檢查輕鬆確定肺結核的診斷。
X線攝影的結合透視有助於提高診斷的準確性，可以發現肋骨、縱隔、橫隔、心臟覆蓋的細小病竈，觀察心、肺、橫隔的動態。
肺結核的常見x線表現爲纖維鈣化的硬結病竈，密度高、邊緣清晰的斑點、線索或結節的浸潤性病竈，密度淡、邊緣模糊的雲霧狀影像乾酪狀病竈，密度高、濃淡不同、環狀邊界透光區的空洞等肺結核病爐通常在肺上部、單側或雙側，存在時間長，性質多樣的病爐混合存在和肺內傳播的跡象。
凡X線胸片上顯示滲出性或滲出增殖性病竈、乾酪樣肺炎、乾酪樣病竈、空洞(除淨化空洞外)，遠均提示爲活動性病變;增殖性病變、纖維包囊緊密的乾酪硬結竈及纖維鈣化竈等，均屬非活動性病變。活動性病竈的痰中仍可找到結核菌。由於肺結核病變多爲混合性，在未達到完全增殖或纖維鈣化時，均仍應考慮爲活動性。
胸部CT檢查對於發現微小或隱蔽性病變，瞭解病變範圍及肺病變鑑別等方面均有幫助。
三、結核菌素(簡稱結素)試驗
是診斷結核感染的參考指標。
舊結素(oldtuberculin、OT)是結核菌的代謝產物，由液體培養的結核菌提取而成，主要含有結核蛋白，OT抗原不純，可能引起非特異性反應，在人羣中調查時，1:2000的OT稀釋液爲0.1ml(5IU)，左前臂屈側注射皮內，48~72小時測量皮膚硬結直徑，小於5mm爲陰性，5~9mm爲弱陽性
結素的純蛋白衍化物(purified protein derivative,PPD)由舊結素濾液中提取結核蛋白精製而成，爲純潔素，不產生非特異性反應。國際上常用的PPD-RT23取代了OT。我國由人型結核菌製成的PPD(PPD-C)和由卡介苗製成的BCG-PPD，純度良好，已廣泛應用於臨牀診斷，皮內注射0.1ml(5IU)硬結平均直徑≥5mm爲陽性反應。除了結素試驗引起局部皮膚反應外，偶爾會引起全身反應。臨牀診斷通常使用5IU，如果沒有反應，一週後可以使用5IU(產生結素增強效果)，如果還是陰性的話，大致可以除去結核感染。
結素試驗仍是結核病綜合診斷中常用的手段之一，有助於判斷是否有結核菌感染。如果有強陽性反應，通常表示活動性結核病。結素試驗陽性反應只表明有結核感染，不一定有病。我國城市成年人患結核感染率在60%以上，因此用5IU結素檢查，一般陽性結果沒什麼意義。結素試驗嬰幼兒診斷價值大於成人，年齡越小，自然感染率越低的3歲以下強陽性反應者應視爲新感染的活動性結核病，需要治療。
